兔色素上皮衍生因子（PEDF）elisa試劑盒操作步驟:

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

 蟲草素 英文名稱：CordycepsCAS號(hào)：73-03-0分子式：251.24

 補(bǔ)骨脂酚英文名稱：BakuchiolCAS號(hào)：10309-37-2分子式：256.38

 補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚英文名稱：Buguzhi two hydrogen flavone etherCAS號(hào)：分子式：338.397

 補(bǔ)骨脂二氫黃酮英文名稱：Psoralen two flavanonesCAS號(hào)：分子式：

 補(bǔ)骨脂定英文名稱：PsoralidinCAS號(hào)：18642-23-4分子式：

 龍腦英文名稱：BorneolCAS號(hào)：507-70-0分子式：154.25

 表沒食子兒茶素英文名稱：EpigallocatechinCAS號(hào)：970-74-1分子式：306.27

表白樺脂酸英文名稱：Betulinic acid.CAS號(hào)：38736-77-5分子式：

 百秋里醇英文名稱：Patchouli alcoholCAS號(hào)：分子式：

 1,8-桉葉素英文名稱：1,8- EucalyptusCAS號(hào)：470-82-6分子式：154.25

 雷公藤內(nèi)酯甲英文名稱：, aCAS號(hào)：84104-71-2分子式：454.68

 13-乙?；?9-羥基巴卡丁III英文名稱：13- acetyl -9- hydroxy Chiba kart IIICAS號(hào)：142203-65-4分子式：630.67938

 亞麻木酚素英文名稱：Flax phenolCAS號(hào)：148244-82-0分子式：686.71

 延胡索乙素英文名稱：TetrahydropalmatineCAS號(hào)：2934-97-6分子式：355.4275