做亮發(fā)光桿菌的幾大重要環(huán)節(jié)：

1.菌種制作

液體母種的制作也有較多方法，我一般就是用小木屑加其他營養(yǎng)料，用錐形瓶培養(yǎng)。此環(huán)節(jié)比固體菌種培養(yǎng)要更仔細(xì)一些，特別注意細(xì)菌的監(jiān)測，菌種環(huán)節(jié)一定要把握好。

2.培養(yǎng)液的滅菌環(huán)節(jié)

此環(huán)節(jié)要嚴(yán)格按照操作規(guī)程，把握好每一步，確保培養(yǎng)液滅菌*。期間注意的是，培養(yǎng)液不能加太滿，否則放氣的時候，液體從放氣閥沖出。個人建議在放氣閥上再安裝一個逆止閥，避免停電。

3.接種環(huán)節(jié)

接種環(huán)節(jié)也是很重要的環(huán)節(jié)，我們一般是將母種先鉤出來放到另一個裝有蒸餾水的大錐形瓶中，然后再倒入培養(yǎng)罐。哥哥環(huán)節(jié)必須有大火保護(hù)，否則容易感染。

4.培養(yǎng)環(huán)節(jié)、監(jiān)測菌種純度（重要環(huán)節(jié)）

個人認(rèn)為此環(huán)節(jié)是液體菌種培養(yǎng)的中心環(huán)節(jié)，也是重要的環(huán)節(jié)。培養(yǎng)菌種嚴(yán)格按照操作規(guī)程，注意每個細(xì)節(jié)。

（1）空氣過濾器和接入培養(yǎng)罐的硅膠管要一起提前滅菌，建議在空氣過濾器和接入培養(yǎng)罐的硅膠管間安裝一個逆止閥，防止培養(yǎng)液倒流，這是很關(guān)鍵的，否則培養(yǎng)時因為內(nèi)外壓力差變化，培養(yǎng)液容易回流。

（2）監(jiān)測菌種純度。這一步是至關(guān)重要的環(huán)節(jié)，此步驟將直接決定你的成敗，監(jiān)測不好可能會導(dǎo)致全軍覆沒。監(jiān)測菌種純度有以下幾種方法：

a.看：看培養(yǎng)液是否透明澄清，菌球是否均勻。培養(yǎng)液不能渾濁。用試管或錐形瓶，從下面接出少量液體（注意，一定要在大火焰的保護(hù)下進(jìn)行），觀察菌球是否懸浮，不能在短時間內(nèi)下沉或上浮。

b.聞：聞放氣閥處是否有菌絲的純香，不能是其他酒精味、酸味甚至惡臭，要回辨別霉菌和細(xì)菌感染時不同的氣味。

c.顯微鏡觀察：顯微鏡觀察一些霉菌的特征，平時可以將已經(jīng)確定的液體菌拿來觀察練習(xí)，借助一些教材，對比觀察，這是經(jīng)驗累積才能確定的，但也是*的。顯微鏡具體使用方法本論壇有介紹。

d.培養(yǎng)監(jiān)測：這一步是簡單也是直觀的，直接反應(yīng)了該亮發(fā)光桿菌是否純凈。具體操作如下：提前做好試管或錐形瓶瓊脂培養(yǎng)基，并提前做好滅菌工作，再用此小錐形瓶或試管，在培養(yǎng)罐的下面放料處，接少量的培養(yǎng)液（這一步兩人操作，一個人負(fù)責(zé)火焰保護(hù)，一個人負(fù)責(zé)接液體），整個過程在火焰的保護(hù)下塞上棉塞。傾斜放置，讓部分瓊脂露出培養(yǎng)液?？刂茰囟龋?-2天即可觀察，霉菌和細(xì)菌都可以盡收眼底，如果有感染，培養(yǎng)罐全體培養(yǎng)液應(yīng)及時放棄，否則后果很嚴(yán)重。

 phospho-SHC (Tyr239/240) 長壽相關(guān)基因lASS5抗體

 phospho-SHC (Tyr317) 長壽相關(guān)基因lASS4抗體

 phospho-SHC (Tyr349) 長壽相關(guān)基因lASS3抗體

 phospho-SHC (Tyr427) 長壽相關(guān)基因lASS2抗體

 Phospho-SHIP1 (Tyr1020) 長壽相關(guān)基因lASS1抗體

 Phospho-SHIP2 (Ser576) 長鏈脂肪酸?；o酶A水解酶抗體

 Phospho-SHIP2 (Tyr1135) 長鏈脂肪酸輔酶A連接酶抗體

 Phospho-SHIP2 (Tyr542) 長鏈脂肪酸輔酶A連接酶1/2抗體

 Phospho-SHIP2 (Tyr580) 叉頭蛋白P3抗體

 Phospho-SHIP2 (Tyr986/987) 叉頭蛋白P1抗體

 Phospho-SirT1 (Ser27) 叉頭蛋白O4抗體
亮發(fā)光桿菌